IZUMO2蛋白是公猪精液中与其繁殖性能密切相关的一种蛋白。为进一步确定IZUMO2蛋白在公猪组织和细胞上的表达定位，本试验通过cDNA末端快速扩增（Rapid Amplification of cDNA Ends,RACE）技术验证猪IZUMO2核苷酸CDS全长序列，构建原核表达质粒pET-28a-IZUMO2，并在大肠杆菌中异源表达。将IZUMO2重组蛋白免疫BALB/c小鼠，制备多克隆抗体，利用间接ELISA和Western Blot测定多克隆抗体效价及特异性反应。结果表明：猪IZUMO2核苷酸CDS序列全长为627 bp，信号肽序列为60 bp，成功构建pET-28a-IZUMO2原核表达载体；Western Blot和SDS-PAGE结果表明，IZUMO2重组蛋白分子质量为22ku，主要以包涵体形式存在，最佳表达条件是0.4mmol/L的IPTG诱导4h；切胶纯化回收的蛋白满足免疫需求，制备的多克隆抗体效价达1:128 000，可以特异性识别猪IZUMO2重组蛋白。本研究验证了猪IZUMO2核苷酸的CDS全长序列，制备了猪IZUMO2原核蛋白和猪IZUMO2多克隆抗体，为IZ...