本研究旨在制备公猪精子顶体蛋白4(Sperm Acrosome Associated 4,SPACA4)的多克隆抗体（Polyclonal antibody,PAb），以期为揭示猪SPACA4蛋白参与精子受精过程的分子机制提供试验材料。从GeneBank上选取公猪SPACA4基因序列（登录号：NM＿001177929.1）编码区，去掉信号肽与终止子，克隆至pET-SUMO表达载体并转化E.coli Rosstta(DE3)感受态细胞，经1 mol/L IPTG诱导表达及亲和层析纯化后获得重组SPACA4蛋白。将重组蛋白免疫小鼠制备SPACA4 PAb，使用间接ELISA检测抗体效价，并利用WesternBlot法验证SPACA4PAb对公猪精子天然蛋白的特异性。重组质粒pET-SUMO-SPACA4能被IPTG诱导表达，主要以包涵体形式存在，SUMO-SPACA4重组蛋白相对分子质量约为25 KDa，鼠源SPACA4PAb能特异性结合重组蛋白，最高效价为1:2048000。经WesternBlot法检测，SPACA4PAb能识别天然SPACA4蛋白。本研究利用原核表达系统成功制备出效价...