本研究旨在构建猪有腔卵泡体外氧化应激模型,为延缓母猪的卵巢功能衰退和提高繁殖利用年限提供参考。本研究分别采用100μmol/L(低浓度组)、200μmol/L(中浓度组)、400μmol/L(高浓度组)的叔丁基过氧化氢(Tertiary-butylhydroperoxide,t-BHP)作为诱导剂处理猪卵泡6 h,通过CCK-8检测卵泡颗粒细胞(GCs)活力。筛选出200μmol/L(中浓度组)t-BHP作为后续处理浓度,用其刺激卵泡1、2、6、12 h。用流式细胞仪检测细胞凋亡率、ELISA检测活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)水平以及用Western blot分析检测线粒体凋亡相关蛋白的表达。结果显示:GCs活力呈现浓度依赖性下降,半数抑制浓度(IC50)为289.7μmol/L;t-BHP诱导的氧化应激可导致GCs凋亡率明显升高(P<0.01),卵泡内ROS在处理6 h后增加(P<0.01),Bcl-2蛋白水平降低(P<0.05),Bax、Caspase 9蛋白水平上升(P<0.05),细胞色素C(Cytochrome C,C...