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中国畜牧杂志

中国畜牧杂志  >>  2024 VOL.60  >>   Issue(2)   >>  346-355

营养饲料

基于Fosmid文库筛选山羊瘤胃源酯类水解酶基因及其原核表达验证

李林芳;刘功炜;杨凯尧;王智伟;崔雯元;杨雨鑫

作者单位:

西北农林科技大学动物科技学院

作者简介:

李林芳(1998-),女,山西运城人,硕士研究生,主要从事动物营养与饲料科学的研究,E-mail:llf151298@163.com;

通讯作者:

*杨雨鑫(1977-),男,河南信阳人,博士,副教授,主要从事动物营养与饲料科学的研究,E-mail:yxyang@nwsuaf.edu.cn;

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摘要
闭合
试验旨在挖掘瘤胃微生物中潜在的酯类水解酶基因并进行原核表达,研究其酶学性质及对芥子碱的降解效果。利用功能筛选方法,从前期构建的山羊瘤胃微生物Fosmid文库中鉴定出潜在的酯类水解酶基因,并在大肠杆菌中异源表达,通过酶活测定及芥子碱的降解研究来筛选功能酶,最后分析酯类水解酶的酶学性质。结果表明:从山羊瘤胃微生物Fosmid文库中鉴定到6个酯类水解酶基因Estg1、Estg2、Esty1、Estp、Estk1和Estk2,并在E.coli BL21(DE3)中成功表达,获得的酯类水解酶的活性均高于空载对照(P<0.05),其中Estp和Estk1的活性最高,分别为205.33 U/mL和212.67 U/mL,其分子量为33、28 ku,且能够降解芥子碱,降解率分别为13.26%和11.66%;酯酶Estp和Estk1在温度为40℃、pH 11时活性最高,在40~50℃、pH8~11条件下相对稳定;金属离子Mn(2+)和Ni2+对酯酶Estp和Estk1的活性有促进作用(P<0.01),有机溶剂正己烷能增强其活性...
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期刊名称:中国畜牧杂志

创办日期:1953年

主管部门:中国科学技术协会

主办单位:中国畜牧兽医学会

刊期:月刊

电话:010-62732723;010-82893431;010-62734608

Email信箱:zgxmzz@cau.edu.cn

国内统一刊号:CN 11-2083/S

国际标准刊号:ISSN 0258-7033