杜仲因其丰富的药用价值，被誉为“植物黄金”。本研究通过常规养分测定及高效液相色谱-质谱联用技术检测杜仲叶活性成分并对其进行网络药理学分析，旨在探讨杜仲叶作为饲料添加剂应用的可能性及其缓解奶牛乳腺炎症的相关作用靶点与通路。利用TCMSP平台整合Swiss Target Prediction数据解析杜仲叶相关基因靶点，整合Gene Card、Drug-Bank和OMIM数据库数据识别乳腺炎症靶点，采用靶点网络相互作用分析，筛选核心功能基因靶标。采用GO功能富集与KEGG通路分析实施注释，阐明杜仲叶影响奶牛乳腺炎症的生物机制及相关信号通路。结果显示：杜仲叶具有丰富的粗蛋白以及粗纤维，其缓解奶牛乳腺炎症的潜在靶点有107个，其中核心靶点有11个，分别是丝氨酸/苏氨酸激酶1(AKT1)、表皮生长因子受体（EGFR）、雌激素受体1(ESR1)、原癌基因（SRC）、前列腺素内过氧化物合酶2(COX2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP1)、激酶插入域受体（KDR）、基质金属蛋白酶2(MMP2)以及细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2);GO/KEGG联合富集分析结果显示，靶点作用包含217类生物过程、49种细胞组分与148种分子功能，涉及碳代谢途径、氮代谢、氧化损伤致癌、内分泌治疗抵抗、丝裂原活化蛋白激酶/ERK(MAPK)通路信号传导及磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B信号通路（PI3K-Akt）通路激活。本研究提示杜仲叶可改善奶牛乳腺炎症，为杜仲叶作为中草药添加剂缓解奶牛乳腺炎症提供参考。