本研究旨在探讨热应激环境下黄曲霉毒素B 1 （AFB 1 ）摄入对奶牛泌乳的影响并验证黄芩苷能否提高热应激与AFB 1 叠加状态下奶牛乳腺上皮细胞的泌乳能力。为检测亚临床AFB 1 剂量下，叠加热应激对MAC-T细胞结构的影响，试验一设计分空白对照（37℃下培养）、AFB 1 （2 mg/L AFB 1 孵育24 h）、HS（42℃热应激1 h）和HS+AFB 1 （2 mg/L AFB 1 和42℃热应激1 h）；为检测黄芩苷对热应激叠加AFB 1 共同作用MAC-T细胞结构的影响，试验二设计分组为AFB 1 （2 mg/L AFB 1 孵育24 h）、AFB 1 +黄芩苷（2 mg/L AFB 1 孵育24 h,4 mg/mL黄芩苷）、HS+黄芩苷（42℃热应激1 h,4 mg/mL黄芩苷）和HS+AFB 1 +黄芩苷（2 mg/L AFB 1 、42℃热应激1 h和4 mg/mL黄芩苷）。采用ELISA、qRT-PCR、Western Blot等方法，检测MAC-T细胞乳糖、乳脂、β-酪蛋白分泌水平，以及JAK2信号通路相关基因和蛋白的表达。结果显示：（1）亚临床剂量的AFB 1 可显著降低MAC-T细胞乳糖、乳脂、β-酪蛋白、脂肪酸、脂质表达合成能力，热应激加剧AFB 1 的这种抑制作用，并显著下调JAK2信号通路相关基因和蛋白表达水平。（2）应用黄芩苷可上调JAK2信号通路相关基因和蛋白表达，进而激活JAK2/STAT5信号通路，缓解热应激与AFB 1 叠加对MAC-T细胞合成和泌乳功能损伤的影响。上述结果证实，热应激可能通过抑制JAK2/STAT5信号通路，加剧AFB 1 对奶牛乳腺上皮细胞合成和泌乳功能的损伤。