研究显示妊娠母猪血液中核糖体蛋白L10（RPL10）基因启动子区域甲基化水平显著下降，提示妊娠母猪体内RPL10蛋白含量可能会升高。为了建立基于RPL10蛋白的猪早孕检测技术，本实验用软件预测RPL10的抗原表位，筛选优势表位并合成抗原肽，将其偶联血蓝蛋白（KLH）后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体，通过间接ELISA评估抗体效价，Western blot验证抗体特异性。使用棋盘法确定了最适抗原包被浓度、最适封闭液以及最适妊娠血清稀释度，构建了RPL10蛋白ELISA检测方法，并使用猪血清样本结合B超诊断结果验证此法的诊断效能。结果显示：RPL10多克隆抗体效价超过6.4×10 4 ,WB显示抗体特异性良好。棋盘法结果显示，当抗血清包被浓度为5μg/mL，封闭液为5%BSA，血清稀释度为1:10时反应条件最优。对24头妊娠25 d及24头未妊娠母猪进行诊断，通过与B超结果比对，基于RPL10蛋白的ELISA检测符合率为87.5%。本研究首次建立了基于RPL10的ELISA诊断方法，也证实RPL10蛋白是猪早孕诊断的新标志物，这也为母猪早期妊娠诊断提供了新方法。