为探讨L-脯氨酸（L-proline）对奶山羊体外胚胎冷冻的保护作用，本实验通过腹腔镜活体采卵-体外胚胎生产（LOPU-IVP）获得奶山羊体外胚胎，在玻璃化冷冻液中添加不同浓度（0、0.25、0.5、1.0、2.0 mol/L）L-脯氨酸，评估解冻胚胎的复苏率、扩张率、囊胚细胞数、凋亡率、移植妊娠率和成羔率。结果显示：与冷冻对照组（0 mol/L L-脯氨酸）相比，添加0.5、1.0 mol/L L-脯氨酸可显著提高胚胎的复苏率和扩张率。其中，添加1.0 mol/L L-脯氨酸组囊胚细胞总数和滋养层细胞数均显著高于冷冻对照组，囊胚凋亡细胞数和凋亡率则极显著低于对照组。添加0.5和1.0 mol/L L-脯氨酸可提升冷冻胚胎移植效率，1.0 mol/L组效果最佳，妊娠率、分娩率和成羔率分别达57.9%、47.4%和42.1%。在本实验条件下，冷冻液中添加1.0 mol/L L-脯氨酸能显著提升奶山羊体外胚胎冷冻效率和胚胎质量，优化的冷冻方案可提高胚胎移植成功率，产业化应用前景广阔。