本实验探究C型利钠肽(C-Type Natriuretic Peptide,CNP)预处理时间与常规培养时间对猪卵母细胞体外成熟(In Vitro Maturation,IVM)的影响,为应用CNP-两步成熟法进一步提高家畜卵母细胞的IVM质量提供参考。首先,以猪卵母细胞常规IVM 44 h为对照组,实验组猪卵母细胞先分别在含50、100、200、400 nmol/L CNP的预处理液中培养6 h,然后在常规IVM液中培养44 h,发现各组卵母细胞存活率差异不显著,100 nmol/L CNP预处理组的第一极体排出率显著高于对照组。随后实验组猪卵母细胞先在含100 nmol/L CNP的预处理液中分别培养6、12、18、24 h,然后在常规IVM液中培养44 h,发现CNP预处理24 h组卵母细胞的存活率显著低于对照组,CNP预处理6 h组和12 h组的第一极体排出率显著高于对照组,并且12 h组的第一极体排出率最高。接着,实验组猪卵母细胞先在含100 nmol/L CNP的预处理液中培养12 h,然后在常规IVM液中分别培养32、36、40、44 h,发现各组卵母细胞存活率差异不显著,CNP预处理12 h+IVM 36、40、44 h组的第一极体排出率显著高于对照组。最后,将排出第一极体的猪卵母细胞进行孤雌激活,发现CNP预处理12 h+IVM 36、40 h组的卵母细胞孤雌激活后的卵裂率和囊胚率显著高于对照组,并且CNP预处理12 h+IVM 36 h组的卵裂率和囊胚率最高。本实验结果表明,猪卵母细胞先在含100 nmol/L CNP的预处理液中培养12 h,然后在常规IVM液中培养36 h,可促进卵母细胞IVM及提高后续胚胎发育能力。