本研究旨在比较皮下埋植与皮下注射外源性褪黑素（MT）对荷斯坦奶牛双同期方案和CIDR+0789同期发情-定时输精方案妊娠率的影响，并解析其对血清生殖激素水平的调控机制。实验一选用360头产后未配奶牛，采用双同期-定时输精方案，分为对照组（120头）、皮下埋植MT组（输精前7 d埋植180 mg,120头）和皮下注射MT组（输精前16 h注射30 mg,120头）。实验二选用240头配后未孕成母牛，采用CIDR+0789方案，分组同实验一，每组80头。通过测定血清MT、促性腺激素释放激素（GnRH）、促卵泡素（FSH）、促黄体素（LH）、雌二醇（E 2 ）和孕酮（P 4 ）水平，并于输精后35 d进行B超妊娠诊断。结果显示：在双同期-定时输精方案中，皮下埋植MT组受胎率为70.00%，较对照组提升16.67%（P<0.01）；初产牛受胎率为75.00%，较对照组显著提升。在CIDR+0789方案中，皮下埋植MT组受胎率为52.50%，较对照组提升13.75%（P<0.01）；初产牛受胎率为56.10%；注射MT组血清GnRH、FSH、LH较对照组均显著提高，埋植MT组血清GnRH、FSH、LH较对照组均极显著提高。研究结果表明，褪黑素通过调控生殖激素分泌来促进卵母细胞成熟、排卵及黄体功能，从而提升定时输精妊娠率；皮下埋植180 mg MT（缓释7 d）较输精前16 h注射30 mg MT（脉冲式）效果显著，尤其适用于初产奶牛繁殖管理。