本研究旨在优化鸭冷冻精液稀释液中青链霉素(penicillin–streptomycin,PS)的最适添加浓度,以提高冻精保种入库的生物安全及受精能力。采集临武鸭精液,分别使用低浓度E1(500 IU/mL)、中低浓度E2(1 000 IU/mL)、中高浓度E3(1 500 IU/mL)和高浓度E4(2 000 IU/mL)4组浓度梯度的PS稀释液进行稀释(第1次稀释与第2次稀释体积比例分别为1:1、1:2)后制作冻精,设E0组不添加PS作为对照。检测鲜精和冻精活力,冻精顶体完整率、质膜完整率、DNA完整率、丙二醛(MDA)含量、菌落总数,并通过人工授精检测受精率。结果显示:E1组、E2组鲜精稀释后冷藏保存0~12 h的精子活力与对照组无显著差异,在保存24 h时E2组精子活力高于E1组与对照组(P<0.05)。E1组冻精解冻后冷藏保存0~2 h的精子活力与对照组无显著差异,E2组、E3组、E4组均低于对照组(P<0.05)。解冻后精子顶体完整率、质膜完整率、DNA完整率在各组间均无显著差异。E1组、E2组与对照组间的MDA含量无显著差异。E1组、E2组、E3组、E4组精液菌落总数均低于对照组(P<0.01),其中E2组、E3组低于E1组(P<0.01)。E2、E3组细菌抑制率分别为99.96%、99.92%,均高于E1组(P<0.05)。E2组种蛋受精率(52.31%)高于E1组与对照组(P<0.05),且比E3组更有优势。由此可推,在稀释液中添加500~1 000 IU/mL PS对冷冻精液质量的影响最小,能有效控制细菌污染与提高受精能力,同时可作为家禽人工授精防控输卵管炎的有效方案。