为探讨XIAP基因在牛黄体组织中的功能,本实验通过反转录PCR、荧光定量PCR和免疫印迹等方法检测了XIAP基因及凋亡相关基因(Caspase-3、Bax、Bcl-2)在牛不同周期黄体中的表达变化。反转录PCR和荧光定量PCR结果显示:XIAP mRNA在前期、中期黄体中表达较高,在后期黄体和白体中几乎观察不到;Caspase-3 mRNA在前期、中期黄体中表达微弱,在后期黄体和白体中高度表达;Bax mRNA在黄体前期、中期表达低,在后期黄体和白体中表达显著升高;Bcl-2 mRNA则在前期、中期(黄体中高度)表达高,而在后期黄体和白体中表达显著降低。免疫印迹检测结果显示:XIAP在前期、中期黄体中表达显著高于后期黄体和白体;Caspase-3和Bax蛋白在前期、中期黄体中表达低,在后期黄体和白体中显著升高;Bcl-2则在前期、中期、后期黄体中表达较高,而白体中表达显著降低。进一步通过质粒转染过表达XIAP基因,发现其能促进牛黄体细胞增殖和孕酮分泌。实时荧光定量和免疫印迹检测显示,XIAP过表达能降低促凋亡基因Caspase-3和Bax的表达,提高抗凋亡基因Bcl-2的表达,同时促进类固醇合成相关基因(StAR、CYP11A1、3β-HSD)的表达,从而参与孕酮分泌。