环境高温是损害种公猪精液质量的重要应激源，可导致精子活率下降、精液量减少和畸形率升高等，同时环境高温还影响公猪常温精液的制备和储运。为探究季节性高温及体外热应激对公猪精液质量、精子运动特性和代谢特征的影响，本研究收集了西南地区某公猪站2021年4月—2024年2月共298头18～30月龄的正常采精公猪6 794条采精记录，其中杜洛克猪1 990条、长白猪1 650条、大白猪2 233条，分析不同季节和品种间的精液质量差异。另采集健康公猪新鲜精液，筛选精子活率在0.8以上、畸形率在0.1以下的样本，混合后设置37～45℃温度梯度孵育150 min筛选热应激条件；随后以37℃孵育2 h为正常对照组、42℃孵育2 h为热应激组，每组至少6个样本，检测精子运动参数，并取2组各6个精子样本进行代谢组学分析。结果表明：夏季高温显著降低杜洛克猪、长白猪和大白猪精子活率及有效精子数；42℃热应激显著降低精子活率及多项运动学参数。代谢组学共鉴定出564种代谢物，其中227种差异显著，主要富集于氨基酸生物合成、ABC转运体和辅因子生物合成等通路。综合以上，短时热应激可损害猪精子运动功能并扰乱代谢稳态，本研究建立的42℃、2 h体外热应激模型可为精液热损伤评价及抗热型稀释液研发提供参考。