本研究旨在评价自主研发的益生菌制剂对中老龄蛋鸡肠道菌群微观环境和免疫功能、产蛋性能的影响。将480只510日龄的海兰灰蛋鸡随机分成4组，每组120只，每组5个重复，每个重复30只。对照组饲喂基础日粮，益生菌组、发酵白头翁组和白头翁组分别在基础日粮中添加4‰复合益生菌、5 g/kg发酵白头翁（保证益生菌组与发酵白头翁组复合益生菌活菌含量一致）、5 g/kg白头翁。饲喂60 d后，统计产蛋性能；采集十二指肠、空肠、回肠，制作组织切片，测定肠绒毛长度、隐窝深度；采集血液，检测免疫指标。结果表明：对照组蛋鸡的平均产蛋率最低（P<0.05），益生菌组蛋鸡的产蛋率最高（P<0.05）；对照组蛋鸡的料蛋比高于益生菌组、发酵白头翁组（P<0.05）；采食量在各组间无显著差异，白头翁组死淘率最低（P<0.05）。益生菌组、发酵白头翁组十二指肠、空肠、回肠绒毛高度显著高于对照组和白头翁组，益生菌组血清雌激素、孕酮、促卵泡素水平高于对照组（P<0.05），促黄体素水平低于对照组（P<0.05）；益生菌组白介素6(IL-6)含量低于对照组（P<0.05），白介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子（TNF-α）水平高于对照组（P<0.05）。在本试验条件下，日粮中添加4‰复合益生菌可显著提高中老龄蛋鸡肠道微观结构、提高免疫和激素水平，延长产蛋效率。