实验旨在研究β-胡萝卜素（β-Carotene,BC）对冷冻保存湖羊精液抗氧化性能的影响，并探究其作用机制。本实验在以“Tris-柠檬酸-果糖”为主的湖羊精液基础稀释液中添加不同浓度的BC(0、10、20、30、40 mg/L)，通过检测精子活率、活力、质膜完整率和顶体完整率，确定BC的最适添加浓度。在此基础上，使用0、100、200、300、400µmol/L的叔丁基过氧化氢（Tert-Butyl Hydroperoxide,T-BHP）处理，通过分析精子活力、活率，确定适宜损伤浓度，以构建体外精子氧化损伤细胞模型，综合精子质量参数、线粒体活性、抗氧化指标及凋亡率，评估BC对精子冷冻损伤的保护作用。结果显示：20 mg/L BC组的冻融精子活力、活率、质膜完整率及顶体完整率均高于对照组（P<0.05）；而30、40 mg/L BC组与对照组间无显著性差异。外加T-BHP浓度为100µmol/L时，精子活率、活力、质膜完整率、顶体完整率、总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）及过氧化氢酶（CAT）活性均低于对照组和20 mg/L BC+100µmol/L T-BHP组（P<0.05），而活性氧（ROS）水平、丙二醛（MDA）含量和凋亡率均显著升高。综合以上，在冷冻稀释液中添加BC能够提高湖羊精液冷冻保存效果，当BC添加浓度为20 mg/L时，可有效抑制T-BHP诱导的精子细胞凋亡，并显著提高精子抗氧化性能，改善湖羊冻精质量。