本实验旨在明确卵泡刺激素（Follicle-stimulating Hormone,FSH）对猪卵巢颗粒细胞增殖、雌激素和孕酮分泌的影响以及潜在调控机制，以期为揭示FSH在卵泡发育过程中的作用提供科学依据。体外分离猪原代卵巢颗粒细胞，通过免疫荧光检测FSHR蛋白在颗粒细胞中的表达，采用CCK-8法检测0、1.25、2.5、5、10、15、20 IU/mL浓度FSH干预24 h和48 h的细胞增殖活性，酶联免疫吸附测定检测10 IU/mL和20 IU/mL FSH干预24 h对细胞雌激素和孕酮分泌的影响，蛋白质印迹技术和实时荧光定量PCR方法分别检测20 IU/mL FSH干预细胞24 h对STAR、3β-HSD、TGF-β1、SMAD2、SMAD3、SMAD4和FST的表达影响及使用PKA、PKC、PI3K、p38 MAPK、MEK、mTOR和AMPK通路抑制剂预处理细胞1 h后20 IU/mL FSH干预细胞24 h对FST基因的表达影响。免疫荧光结果表明：本研究分离的猪原代卵巢颗粒细胞80%以上都表达FSHR。10、15、20 IU/mL FSH浓度干预均可显著促进在24 h和48 h时颗粒细胞增殖。10、20 IU/mL的FSH干预均可显著促进孵育24 h时细胞雌激素和孕酮的分泌，并促进细胞中STAR和3β-HSD基因mRNA和蛋白表达。此外，20 IU/mL的FSH干预可以抑制孵育24 h时细胞中TGF-β1、SMAD2、SMAD3、SMAD4和FST基因mRNA和蛋白的表达，且相比于FSH对照组，PKA、PI3K、p38 MAPK、mTOR和AMPK通路抑制剂预处理显著逆转了FSH对FST表达的抑制作用。本研究揭示FSH可以促进猪原代卵巢颗粒细胞增殖、雌激素和孕酮分泌，可能与抑制颗粒细胞中TGF-β1和FST表达有关。