体细胞克隆技术（SCNT）在生物医学研究、濒危物种保护和农业生产中具有重要应用价值，但克隆效率低下是制约其发展的关键瓶颈。体细胞的表观遗传修饰与能量代谢密切相关，本研究旨在探究不同浓度（0、1、5、10μmol/L）糖酵解促进剂PS48处理猪胎儿成纤维细胞（PFF）对克隆胚胎发育效率的影响及潜在机制。实验通过qPCR检测关键代谢基因表达、TMRE染色评估线粒体膜电位、生化法测定乳酸含量、进行体细胞核移植实验评估胚胎发育效率，并利用转录组测序（RNA-seq）进行系统分析。结果显示：与对照组相比，5μmol/L PS48处理组下调了COX1、COX3、ATP6的mRNA表达量，其中ATP6显著下调，显著上调LDHA的mRNA表达量。与对照组相比，处理组的线粒体膜电位显著降低，细胞内乳酸含量无显著变化，体细胞核移植胚胎的囊胚形成率显著提高。糖酵解促进剂PS48改变PFF能量代谢途径，从而提供了一种提高猪克隆胚胎发育效率的有效方法。