为提高兰州大尾羊解冻后精液品质，本实验从不同稀释液（A、B、C、D、E、F稀释液）、冷冻方式（8层纱布包裹、37℃的170 mL水浴降温、37℃的200 mL水浴降温、37℃的230 mL水浴降温、37℃的260 mL水浴降温）、熏蒸高度（1、2.5、4、5.5、7 cm）3个方面优化冷冻程序，在此基础上添加不同浓度（0、0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%）的大豆卵磷脂，探究对解冻后精子活率、顶体完整率和质膜完整率的影响。结果表明：在6种稀释液中，E基础液冷冻保存效果最佳，其解冻后精子活率高于A、C、D、F稀释液（P<0.05），解冻后精子顶体完整率和质膜完整率最高，均高于A稀释液（P<0.05）；在不同冷却方式中，8层纱布包裹法解冻后精子活率、顶体完整率和质膜完整率最高；不同液氮熏蒸高度比较结果显示，当熏蒸高度为4 cm时，解冻后精子活率、顶体完整率和质膜完整率最高；在E基础液中添加不同浓度的大豆卵磷脂后发现，添加2%大豆卵磷脂解冻后精子活率高于其他处理组（P<0.05）、顶体完整率和质膜完整率最高。在本实验条件下，用含2%大豆卵磷脂的E基础液与精液按照1:3的比例稀释后，用8层纱布包裹降温平衡后置于距离液氮面4 cm处熏蒸8 min后投入液氮冷冻保存，解冻后精子品质最好。