为了探究猪miR-24-3p影响精子活力的分子机制，试验采用生物信息学方法对猪miR-24-3p的保守性、转录因子和靶基因进行了研究。首先利用miRbase数据库分析不同物种间miR-24-3p序列的保守性；通过NCBI数据库检索miR-24-3p前体序列信息，然后利用JASPAR和AnimalTFDB在线软件对猪miR-24-3p启动子区转录因子结合位点进行预测；利用TargetScan、miRDB、miRWalk数据库预测猪miR-24-3p的靶基因，利用KOBAS数据库对靶基因进行GO功能和KEGG通路富集分析。结果表明：miR-24-3p在不同物种间中高度保守；miR-24-3p存在2条前体序列，ssc-mir-24-1和ssc-mir-24-2前体序列中共同含有STAT3和VDR等转录因子结合位点；3个数据库预测取交集后共得到362个靶基因，这些靶基因主要富集在RNA聚合酶II介导的转录正调控、蛋白质磷酸化、ATP结合、染色质结合、细胞核、细胞质等GO条目和MAPK信号通路中。结果表明猪miR-24-3p可能通过上游转录因子STAT3、VDR和MAPK信号通路共同调控精子活力。