本研究旨在探讨oar-miR-214＿3p对凉山黑绵羊卵巢颗粒细胞增殖及雌激素分泌的影响及其调控机制，丰富凉山黑绵羊生殖生理基础理论。实验通过过表达和抑制oar-miR-214＿3p在凉山黑绵羊卵巢颗粒细胞中的表达，利用CCK8检测细胞增殖、流式细胞术分析细胞周期变化；构建GDF9野生型和突变型载体，干扰颗粒细胞，qRT-PCR检测GDF9表达，并通过ELISA测定雌激素分泌水平。结果表明：48 h为最佳干预时间，过表达oar-miR-214＿3p组极显著促进细胞增殖并增加G1期细胞比例，促进雌激素分泌，GDF9基因表达受到抑制；抑制oar-miR-214＿3p基因后G1期细胞比例显著降低，雌激素分泌极显著下降，而GDF9基因表达显著增加。研究证实oar-miR-214＿3p通过负靶向GDF9参与卵巢颗粒细胞增殖和雌激素分泌的调控，该研究对进一步探讨oar-miR-214＿3p在卵泡发育、闭锁及排卵领域的调控作用具有重要意义。