雌激素受体β基因（Estrogen Receptor Beta,ESR2）参与了绵羊的卵泡发育，但其调控机理尚不清楚。本研究以和田羊为试验对象，以NCBI数据库中绵羊ESR2基因启动子区2 871 bp序列为模板进行克隆测序，通过在线软件预测ESR2启动子区转录因子结合位点、CpG岛和调控元件，并以ESR2基因启动子区2 871 bp序列为模板构建6个连续缺失的荧光素酶载体，利用双荧光素酶报告基因系统筛选ESR2核心启动子区。本研究成功克隆了和田羊ESR2基因启动子区2 871 bp的序列，通过软件预测发现，和田羊ESR2基因启动子区存在4个潜在的转录起始位点、67个转录因子结合位点、1个TATA-box以及2个CpG岛。双荧光素酶活性检测结果表明ESR2基因启动子区位于L7(-527～-156)。本文研究结果为进一步探究绵羊ESR2基因启动子对绵羊卵泡发育的调控提供了新线索。