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中国畜牧杂志

中国畜牧杂志  >>  2026 VOL.62  >>   Issue(02)   >>  341-345

畜牧生物技术

扬州鹅IL-4蛋白原核表达及其多克隆抗体制备

杜玉艳;柴文娴;江慧;郭旺;张钰;张扬;徐琪;陈国宏;

作者单位:

1.扬州大学动物科学技术学院2.常州市动物疫病预防控制中心

作者简介:

杜玉艳(2001-),女,安徽阜阳人,硕士研究生,研究方向为动物遗传育种与繁殖,E-mail:1764946509@qq.com;

通信作者:

陈国宏(1963-),男,博士,教授,主要从事畜禽遗传资源评价、保护与利用研究,E-mail:ghchen@yzu.edu.cn;0

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摘要
闭合
白细胞介素4(Interleukin 4,IL-4)是一种调节巨噬细胞极化的关键多功能性细胞因子,在鹅抗病毒免疫中发挥着重要作用。为制备抗鹅白细胞介素4(IL-4)的多克隆抗体,本研究首先以从扬州鹅脾脏组织中获取的cDNA为模板,通过聚合酶链式反应扩增、克隆扬州鹅IL-4基因,并将该基因克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中,经测序验证正确后将其命名为pGEX-6P-1-goose-IL-4。将pGEX-6P-1-goose-IL-4表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,分别用0.2、1、5 mmol/L的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)在16℃和37℃下诱导表达。SDS-PAGE和Western Blot结果均显示:在0.2 mol/L IPTG 、16℃条件下诱导20 h可高效表达为35 kDa鹅IL-4融合蛋白。随后,用纯化后的扬州鹅IL-4融合蛋白免疫BALB/c小鼠8次,采血验证多克隆抗体产生情况。Western Blot结果表明,所制备的抗体能特异性检测鹅IL-4融合蛋白,证明抗体制备成功。本研究为进一步研究鹅IL-4蛋白的免疫功能奠定了基础。
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期刊名称:中国畜牧杂志

创办日期:1953年

主管部门:中国科学技术协会

主办单位:中国畜牧兽医学会

刊期:月刊

电话:010-62732723;010-82893431;010-62734608

Email信箱:zgxmzz@cau.edu.cn

国内统一刊号:CN 11-2083/S

国际标准刊号:ISSN 0258-7033