肾母细胞瘤1相关蛋白(Wilms Tumor 1-Associated Protein,WTAP)作为N6-甲基腺嘌呤(N6-methy ladenosine,m6A) RNA甲基化酶复合体的关键组分,在细胞生长发育中发挥重要作用,但其在长白猪中的功能研究尚不清楚。本试验旨在探究WTAP的理化性质、系统进化及其在长白猪各组织中的表达规律。试验以长白猪卵巢组织cDNA为模板,PCR扩增并克隆长白猪WTAP基因的目的片段,利用在线软件对长白猪WTAP蛋白进行生物信息学分析,构建真核表达载体3.1-WTAP-eGFP,并成功转染至猪卵丘细胞。随后使用实时荧光定量PCR技术(RT-qPCR)检测WTAP基因在长白猪心、肝、脾、肺、肾、肠、卵巢、背最长肌中的表达水平。结果显示,长白猪WTAP基因CDS全长序列大小为1 188 bp,共编码395个氨基酸。长白猪WTAP基因氨基酸序列与人的同源性最高,与小鼠的同源性最低。WTAP分子式为C 1862 H 3011 N 557 O 650 S 12 ,属于不稳定性亲水蛋白。长白猪WTAP蛋白二级结构中α-螺旋(47.85%)和无规则卷曲(39.49%)占比较高。构建的真核表达载体3.1-WTAP-eGFP转染至猪卵丘细胞后,与空载体组相比,WTAP基因表达量升高(P<0.05)。RT-qPCR结果表明,WTAP在长白猪各组织中均有表达,其中在卵巢的表达量最高,在肺的表达量最低。本研究成功克隆了长白猪WTAP基因,构建了3.1-WTAP-eGFP真核表达载体,并发现WTAP基因在长白猪卵巢的表达量最高,为深入探究WTAP基因在长白猪繁殖过程中的作用奠定了基础。