中国畜牧杂志 >> 2025， VOL.61 >> Issue(11) >> 249-253
遗传育种
绵羊miR-432对MFSD12基因表达的调控
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摘要
闭合
试验旨在探讨miR-432与MFSD12基因的靶向关系。利用miRanda、targetscan在线预测miR-432的靶基因，并对靶基因3'-UTR区可能与miR-432结合的位点进行分析。利用Xho I、Not I将绵羊MFSD12基因的野生型及突变型序列插入psiCHECK-2载体，构建psiCHECK-2-MFSD12-W-3'-UTR和psiCHECK-2-MFSD12-W-3'-UTR载体并与miR-432 mimics及其阴性对照共转染293T细胞，利用双荧光素酶试剂盒测定荧光素酶活性。同时利用荧光定量PCR和Western Blot检测过表达/抑制miR-432后MFSD12在mRNA和蛋白表达水平的变化。结果显示，与阴性对照组相比，psiCHECK-2-MFSD12-W-3'-UTR+miR-432 mimics荧光素酶活性极显著降低。转染miR-432 mimics显著下调MFSD12基因mRNA和蛋白的表达，而转染miR-432inhibitor组与阴性对照组相比，MFSD12基因mRNA和蛋白的表达差异不显著。本研究成功构建了MFSD12野生型及突变型载体，证实...
参考文献
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