为了研究羔羊睾丸（Lamb Testicular,LT）细胞eIF3i蛋白的生物学功能，试验通过克隆测序获得eIF3i基因并构建系统进化树，采用生物信息学软件分析其生物学特征并将其编码基因的PCR扩增产物亚克隆至pDsRED-Monomer-N1真核表达载体，构建重组质粒pDsRED-Monomer-N1-eIF3i，经酶切、测序鉴定正确后，转染至HEK-293T细胞，Western Blotting分析eIF3i蛋白的表达情况，激光共聚焦显微镜观察eIF3i蛋白在HEK-293T细胞内的定位。结果显示，羔羊LT细胞eIF3i基因大小为978 bp，编码345个氨基酸，其序列与绵羊的亲缘关系最近（相似性高达99.2%），与家鼠亲缘关系最远（相似性为55.0%）。eIF3i是一种无信号肽和跨膜结构、稳定亲水性非分泌蛋白；eIF3i的二级结构主要由延伸链、无规则卷曲构成，与三级结构预测结果一致；eIF3i无核定位和核输出信号；此外，试验成功构建出重组质粒pDsRED-Monomer-N1-eIF3i,eIF3i蛋白在HEK-293T细胞中成功表达，其大小约为36 KDa,eIF3i定位于H...