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中国畜牧杂志

中国畜牧杂志  >>  2025 VOL.61  >>   Issue(07)   >>  388-394

动物健康

抗菌肽Stomoxyn的重组乳酸菌表达及抑菌活性研究

胡明阳;李毓雯;赵璐;方禹鑫;董娜;

作者单位:

东北农业大学动物科学技术学院

作者简介:

胡明阳(1998-),男,博士研究生,主要从事动物营养与饲料科学研究,E-mail:humingyang0505@163.com;

通讯作者:

董娜(1979-),女,博士,主要从事动物营养与环境控制研究,E-mail:ndong@neau.edu.cn;0

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摘要
闭合
为研究抗菌肽Stomoxyn在乳酸乳球菌中的高效表达,试验将氯离子诱导型启动子(Chloride-Inducible Promoter,CIP)和经乳酸乳球菌密码子偏好性优化后的抗菌肽Stomoxyn基因分别克隆至载体pUC57中,并通过不同的双酶切组合获得启动子和抗菌肽基因。随后,利用T4连接酶分别将启动子和抗菌肽基因先后插入pNZ8048质粒中,挑选阳性克隆进行验证,并使用电转法构建重组乳酸乳球菌。氯化钠诱导表达后,对菌体蛋白进行了Tricine-SDS-PAGE分析和Western blot分析。最后通过最小抑菌浓度检测重组肽的抑菌效果。结果表明:成功构建空载乳酸乳球菌NZ9000/pNZ8048-CIP和重组乳酸乳球菌NZ9000/pNZ8048-CIP-Stomoxyn。在氯化钠诱导下,乳酸乳球菌NZ9000/pNZ8048-CIP-Stomoxyn胞内成功表达重组Stomoxyn(rStomoxyn)蛋白,分子质量约为5.3 ku。在0.4 mol/L NaCl诱导6 h后,rStomoxyn达到最高水平24μg/L。rStomoxyn对革兰氏阴性菌具有更强的抑菌活性。本研...
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期刊名称:中国畜牧杂志

创办日期:1953年

主管部门:中国科学技术协会

主办单位:中国畜牧兽医学会

刊期:月刊

电话:010-62732723;010-82893431;010-62734608

Email信箱:zgxmzz@cau.edu.cn

国内统一刊号:CN 11-2083/S

国际标准刊号:ISSN 0258-7033