本研究旨在比较高海拔与低海拔地区绵羊精子对氧化应激的耐受差异，进而评估其在冷冻保存过程中的抗冻性，为种质资源开发与利用提供理论支持。选择云贵高原地区的乌骨绵羊和江浙地区的湖羊为研究对象，选取3只成年乌骨绵羊和3只成年湖羊进行精液采集，后通过计算机辅助精子分析系统（CASA）测量精子活力，并检测精液体积和密度。冷冻复苏后，通过荧光显微镜检测精子质膜和顶体完整率，并使用相关试剂盒测定精液的抗氧化能力。结果表明：乌骨绵羊与湖羊在新鲜精液体积、精液密度以及精子活力方面无显著差异，但乌骨绵羊的新鲜精液总抗氧化能力（T-AOC）、过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）含量高于湖羊（P<0.05），丙二醛（MDA）含量低于湖羊（P<0.05）。此外，冷冻复苏后乌骨绵羊精液的抗氧化能力仍显著优于湖羊，包括活性更高（P<0.05）,MDA含量更低（P<0.05）。冷冻复苏后，乌骨绵羊精子的活力、结构完整性（包括顶体完整率和质膜完整率）优于湖羊（P<0.01）。综合以上，冷冻复苏后高海拔地区乌骨绵羊精液的抗氧化性显著高于低海拔地区湖羊。