本研究旨在克隆多浪羊PAK1基因,并进行生物信息学分析,探究PAK1基因在多浪羊初次发情过程中不同组织的表达水平,深入理解PAK1基因在绵羊繁殖中的作用。选取初情期前、初情期和初情期后的健康雌性多浪羊,采集其性腺轴(Hypothalamic-pituitary-gonadal Axis,HPG)中的各种组织样本。根据NCBI中已公布的绵羊PAK1基因序列,设计特异性引物并以初情期各组织cDNA为模板进行PCR扩增,并进行基因克隆及测序。通过生物信息学软件对PAK1基因序列进行分析,并应用qPCR技术,对多浪羊PAK1基因不同时期不同组织的相对表达进行分析。结果显示,多浪羊PAK1基因扩增片段长度为1 813 bp,其中CDS区长度为1 635 bp,共编码544个氨基酸,该基因与GenBank中绵羊预测mRNA序列的相似性达99.94%。系统进化树的分析结果表明,多浪羊PAK1基因在进化上与牛的亲缘性较高,而与鸡的进化距离最远。qPCR试验结果表明,多浪羊HPG轴中的PAK1基因在不同组织和时期均显著表达。特别是在初情期,PAK1在下丘脑的表达高于其他组织(P<0.05)。本研究...