为探究肌球蛋白轻链3(Myosin Light Chain 3,MYL3)基因在猪肌肉生长发育中发挥的作用，本研究采用Sanger测序法对藏猪和大约克猪MYL3基因5'侧翼区进行了单核苷酸多态性（Single Nucleotide Polymorphism,SNP）的筛选与基因分型；同时应用实时荧光定量PCR(qPCR)技术对不同生长阶段藏猪及大约克猪背最长肌组织中MYL3基因的mRNA表达量进行检测。结果表明：MYL3基因的5'侧翼区，存在C-351T、A-405G、A-466G与A-1413G4个突变位点，结合转录因子预测发现，A-1413G位点可能是MYL3基因调控猪肌肉生长发育相关的重要位点；30日龄，藏猪MYL3 mRNA表达量显著高于大约克猪；90日龄，藏猪MYL3mRNA表达差异不显著；180日龄，藏猪MYL3mRNA表达量显著低于大约克猪，推测MYL3基因在促进猪肌肉生长发育过程中发挥重要作用。本研究为进一步探究MYL3基因在猪肌肉中的分子调控机理提供了理论参考。