本研究旨在筛选定时人工授精（Timed Artificial Insemination,TAI）当天奶牛尿液差异代谢物，分析其对TAI后妊娠状态的预测作用。实验选择宁夏某奶牛场42头健康经产荷斯坦奶牛（2～3胎次），体况评分相近，经同期发情处理后，在TAI时采集尿液，TAI后18～24 d采用计步器观察返情，第35天采用B超进行妊娠诊断。随后根据诊断结果（妊娠、未妊娠、返情）将3组尿液样本应用气相色谱质谱方法（GC-MS）进行分析。依据诊断结果将奶牛分为妊娠组（n=23）、未妊娠组（n=6）和返情组（n=13）,3组共检测到60个代谢物。通过主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA）发现未妊娠组与妊娠组、返情组样品具有明显分离趋势；使用VIP>1,P<0.01，且FC>2或<0.5进行差异代谢物的筛选，结合ROC曲线下面积（AUC）>0.8，共筛选出多巴胺和木糖醇2种差异代谢物；返情组尿液中多巴胺低于其他两组（P<0.05），可作为预测返情组奶牛的生物标志物；未妊娠组奶牛尿液中木糖醇低于其他两组（P<0.05），可作为预测...