试验旨在研究依赖性蛋白激酶(ROCK)抑制剂Y-27632对兔胚胎干细胞(rbESCs)冻存后复苏效果的影响,以期提高rbESCs的复苏存活率,从而加速rbESCs的建系。设置DMSO组与Y-27632组,在rbESCs复苏后的培养基中分别添加相同体积的DMSO与Y-27632(终浓度为10μmol/L),培养12 h后换液,通过碱性磷酸酶(AP)染色、克隆数目计数和CCK8等技术检测2组rbESCs的复苏存活率和增殖情况,同时运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测相关基因表达情况。结果表明:添加Y-27632可促进rbESCs复苏时克隆形成(P<0.05);在增殖能力方面,添加Y-27632后rbESCs增殖基因PCNA、RAC1和抗凋亡基因BCL2表达升高(P<0.05),Y-27632提高了rbESCs的增殖能力(P<0.05);在多能性方面,添加Y-27632后rbESCs多能基因OCT4、KLF4、C-MYC表达上升(P<0.05),且形成的拟胚体具有三胚层分化能力。本试验表明,ROCK抑制剂Y-27632可以显著提高rbESCs冻存后的复苏存活...