神经介素B(Neuromedin B,NMB)作为一种重要的神经肽,参与调节摄食、激素分泌、细胞生长和生殖等多种生物学作用。本研究旨在克隆山羊NMB基因并进行序列分析,检测NMB基因和蛋白在山羊体内的表达情况。根据山羊NMB基因的预测序列(XM_005695000.3),设计并合成能扩增包括CDS区的全长序列的扩增引物;通过PCR扩增获得山羊NMB基因片段,克隆获得pMD19-T-NMB重组质粒;利用生物信息分析软件或网址,对山羊NMB核苷酸和氨基酸序列进行分析;通过实时荧光定量PCR(qPCR)和蛋白质印迹法(Western Blot,WB)检测NMB mRNA和蛋白在山羊组织中的表达情况。结果成功克隆出506bp的山羊NMB基因,包括366bp的CDS序列,编码121个氨基酸,成熟肽为NMB-32,保守序列为NMB-10(GNLWATGHFM);山羊与绵羊、牛、猪、大鼠、小鼠、人和鸡的成熟肽均为NMB-32,都包括相同的NMB-10;山羊与绵羊NMB核苷酸和氨基酸同源性相对较高,遗传进化的关系较为接近,与大鼠、小鼠和鸡的同源性相对较低,遗传进化的关系相对较远;山羊NMB氨基(N-)...